凝膠凈化簡單介紹

　　一、凝膠色譜技術(shù)是以多孔凝膠為固定相，利用凝膠孔的空間尺寸效應(yīng)，使不同大小的分子按照由大到小的洗脫順序達(dá)到分離的高效液相色譜(HPLC)方法，從而達(dá)到凈化的目的。此外，凝膠色譜還有因為惰性微球表面對有機(jī)物吸附小所以柱污染小，以及脫鹽等優(yōu)點。
 

　　二、在凝膠色譜中，流動相只起溶解樣品的作用，以有機(jī)溶劑為流動相的凝膠滲透色譜(GPC)應(yīng)用較多，而以水為流動相的凝膠過濾色譜(GFC)的應(yīng)用相對較少，這主要是因為水溶性大分子不僅可以溶于水，通常也能溶于有機(jī)溶劑中。四氫呋喃、氯仿、甲苯和二甲基甲酰胺等非極性有機(jī)溶劑是常用的流動相。在凝膠色譜中，固定相表面與溶質(zhì)分子間不存在化學(xué)相互作用，即固定相是惰性多孔材料。目前凝膠色譜固定相主要使用半硬質(zhì)凝膠(如聚苯乙烯凝膠)和硬質(zhì)凝膠(如多孔硅膠和多孔玻璃珠)。軟質(zhì)凝膠(如葡聚糖)因不耐壓，通常只用于低壓凝膠色譜。
 

　　三、主要用于高分子化合物的分子量及其分布的測定、中小分子有機(jī)物的分離與定量分析、生物大分子純化(制備凝膠色譜)、凝膠色譜指紋圖譜(如原油及其重質(zhì)組分的評價)和樣品凈化。凝膠滲透色譜(GPC)用于樣品凈化的主要目的是為后續(xù)分析除去干擾物質(zhì)(如大分子基體物質(zhì))或?qū)悠愤M(jìn)行濃縮。目前，GPC凈化所用凝膠柱尺寸比用于GPC分析的要大。GPC樣品凈化采用的操作方式主要是為了分析生物樣品中的小分子有機(jī)物而除去脂肪、蛋白質(zhì)等大分子干擾物質(zhì)；有時為了采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(HPLC-MS)等技術(shù)分析生物大分子，也可采用GPC除去樣品中的小分子或脫鹽。