飼料中氨基酸的測(cè)定
更新時(shí)間：2020-04-02
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方法原理：
1、酸水解法
常規(guī)（直接）水解法是使飼料蛋白在110°C、6mol/L鹽酸作用下，水解成單一氨基酸，再經(jīng)離子交換色譜法分離并以茚三酮做柱后衍生測(cè)定。水解中，色氨酸全部破壞，不能測(cè)量。胱氨酸和蛋氨酸部分氧化，不能測(cè)準(zhǔn)。氧化水解法是將飼料蛋白中的含硫氨基酸（胱氨酸、半胱氨酸和蛋氨酸等）用過甲酸氧化，然后進(jìn)行酸解，再經(jīng)離子交換色譜分離、測(cè)定。水解中色氨酸被破壞，不能測(cè)定。酪氨酸在以偏重亞*做氧化終止劑時(shí)，被氧化，不能測(cè)準(zhǔn)。酪氨酸、苯丙氨酸和組氨酸則坐終止劑時(shí)被氧化，不能測(cè)準(zhǔn)。
2、堿水解法
飼料蛋白在110°C、堿的作用下水解，水解出的色氨酸可用離子交換色譜或高校反相色譜分離、測(cè)定。
3、酸提取法
飼料中添加的氨基酸以稀鹽酸提取，再經(jīng)離子交換色譜分離、測(cè)定。
儀器、設(shè)備：
1、實(shí)驗(yàn)室用樣品粉碎機(jī)
2、樣品篩：孔徑 0.25mm
3、分析天平：感量0.0001g
4、真空泵與真空規(guī)
5、噴燈或熔焊機(jī)
6、恒溫箱或水解爐
7、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器或濃縮器：可在室溫至65°C間調(diào)溫，控溫精度±1°C，真空度可低至3.3×10三次方Pa
8、氨基酸自動(dòng)分析儀：茚三酮柱后衍生離子交換色譜儀，要求各氨基酸的分辨率＞90%
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